2025-08-27 06:17
我国全国范围内,目前已知蛇类包括亚种在内将近两百种。其中毒蛇约占四分之一。除蝮蛇广为分布在我国东北、华北、华中,和西南地区外,其他大都分布于南方诸省。我国产有的近五十种毒蛇中,具有剧毒且对人畜危害较大者,计有十多种。
一般蛇毒的新鲜毒液呈蛋清样粘稠弱酸性,有特殊腥味,含水量约为65%~80%,~,常温下易失活,置冰箱中1周后有部分失去活力。
蛇毒中的蛋白类物质是蛇毒主要毒性成分,包括蛇毒素和酶两大类,所以遇重金属离子、乙醇、酚类物质时,立即产生沉淀;高温环境产生絮状沉淀;遇氧化剂(MnSO4、H2O2)、还原剂(亚硫酸钠)、强酸、强碱等易被破坏,亦易被蛋白水解酶所分解;紫外线照射也能使蛇毒失活。经甲醛处理后失去毒性,但仍保持其抗原性,或变成类毒素。
抗蛇毒血清是用蛇毒作为抗原 ,给实验动物反复进行注射免疫 ,一定时间后使实验动物产生一定要求量的抗体 ,然后采血分离提纯而成 ,是专供治疗毒蛇咬伤的特异性生物制品 ,同时为蛇伤患者提供速效、高效、特效的药物。注射抗蛇毒血清使人体立即获得对相应蛇毒的抵抗力 ,以中和蛇毒的毒性作用 ,这就是蛇伤的人工被动免疫。
抗蛇毒血清是以蛇毒作为抗原免疫动物,动物受抗原刺激后,产生一系列的免疫反应,抗原经巨噬细胞的各类酶的作用下,抗原决定蔟与巨噬细胞的mRNA结合,将抗原(蛇毒)信息传递给T细胞,由T细胞传给B细胞,B细胞受到刺激产生抗体。所以抗蛇毒血清利用该原理制备的抗体,能与该抗原(蛇毒)特异性结合,形成抗原抗体复合物,使蛇毒失去毒性作用
抗蛇毒血清的制备首要条件是蛇毒(抗原)、动物(免疫对象)和纯化设备(抗体提纯)。
1、抗原制备:选择健康蛇取毒,新鲜毒液经2000.2500转离心处理15分钟左右,以除去杂质,上清经冻干成粉状备用。干燥之蛇毒需测定其毒力,应选择毒性强、抗原谱广(免疫电泳检验)的蛇毒作为抗原。
2、动物免疫:免疫用动物可用兔、羊、马等,常选用马匹是由于马体大采血量多。
基础免疫:注射第一针或第二针后休息一个月或二个月再开始免疫,称其为基础免疫,简称为基免。
超免:基免后休息两个月,开始正式免疫,通常每星期注射一针,剂量由小渐渐增人,称超免,一般连续注射5-6针后试血,测定血液中抗体水平,直至免疫成功。
3、抗体提纯:免疫球蛋白纯化有多种,有盐析法(硫酸铵、硫酸钠法),冷乙醇沉淀法,离子交换层析法、凝胶过滤法、电泳法等等。其中以硫酸铵盐析法最方便,也最经济,提取蛋白质活性也比较稳定。缺点是纯度稍差些,若要高纯度的球蛋白常常是几个方法结合在一起使用可达到理想效果。商业上大规模纯化抗体常采用盐析法,产品也能达到规定要求。
(1)单价抗蛇毒血清:是以一种蛇毒为抗原免疫动物,使动物产生抗体,经纯化后的抗体只能中和该种蛇毒,称单价抗蛇毒血清。例如:用银环蛇毒免疫动物,使动物产生抗银环蛇毒的抗体,纯化制备成抗蛇毒血清只能中和银环蛇毒。也即只能治疗一种毒蛇咬伤。
(2)双价和多价抗蛇毒血清:以两种或两种以上蛇毒对动物进行免疫,制备成的抗蛇毒血清可以中和两种或两种以上蛇毒,称双价和多价抗蛇毒血清。临床上可以治疗两种或两种以上毒蛇咬伤。江南JN体育